出品公司:	ATCC
細(xì)胞名稱:	HCC1937細(xì)胞, ATCC CRL-2336細(xì)胞, 人乳腺癌細(xì)胞
細(xì)胞又名:	HCC-1937
存儲人:	AF Gazdar, AK Virmani
種屬來源:	人
組織來源:	**
疾病特征:	原發(fā)性導(dǎo)管癌; 3級, IIB期
細(xì)胞形態(tài):	上皮細(xì)胞樣，多角形
生長特性:	貼壁生長
培養(yǎng)基:	RPMI-1640(GIBCO,貨號31800022)，90%；FBS，10%。
產(chǎn)品目錄號:	CRL-2336
生長條件:	氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%; 溫度：37 ℃,
傳代方法:	1：2至1：6，每周2次。
凍存條件:	90% 完全培養(yǎng)基+10% DMSO，液氮儲存
支原體檢測:	陰性
**等級:	1
STR:	Amelogenin: X CSF1PO: 12 D13S317: 13 D16S539: 13,14 D5S818: 12 D7S820: 9,10 THO1: 6 TPOX: 11 vWA: 16,17
參考文獻(xiàn):	Tomlinson GE, et al. Characterization of a breast cancer cell line derived from a germ-line BRCA1 mutation. Cancer Res. 58: 3237-3242, 1998. PubMed: 9699648   Gazdar AF, et al. Characterization of paired tumor and non-tumor cell lines established from patients with breast cancer. Int. J. Cancer 78: 766-774, 1998. PubMed: 9833771

HCC1937細(xì)胞ATCC CRL-2336人乳腺癌細(xì)胞特點(diǎn)和簡介

這株細(xì)胞1995年10月13日*初來源于原發(fā)性導(dǎo)管癌, 用了11.5個月建株。 腫瘤分類為TNM IIB期, 3級。 BRCA1分析表明這株細(xì)胞是BRCA1 5382C突變純合的, 而來源于同一病人的類淋巴母細(xì)胞細(xì)胞株在這個突變位點(diǎn)上是雜合的。 另兩個家庭成員也有這個突變; 一個同卵雙生姐妹也患有乳腺癌。 這株細(xì)胞有一個后天的TP53突變, 而其野生型等位基因丟失; 一個PTEN基因的后天的純合缺失, 以及多個與乳腺癌發(fā)病機(jī)理相關(guān)的位點(diǎn)上發(fā)生的雜合突變。 這株細(xì)胞Her2-neu和p53表達(dá)都呈陰性。 HCC1937的上皮細(xì)胞特異性標(biāo)志上皮細(xì)胞糖蛋2(EGP2)和細(xì)胞角蛋白19都呈陽性。雌激素受體(ER)和孕酮(PR)表達(dá)陰性。 來源于同一患者的EBV轉(zhuǎn)化的類淋巴母細(xì)胞株(HCC1937BL)也有供應(yīng), ATCC目錄號為CRL-2337。 在本庫通過支原體檢測。 在本庫通過STR檢測。

HCC1937細(xì)胞ATCC CRL-2336人乳腺癌細(xì)胞接受后處理

1) 收到細(xì)胞后，請檢查是否漏液 ，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。
  2) 請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長 狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
  3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加 6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
  4) 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%請及 時進(jìn)行細(xì)胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
  5) 接到細(xì)胞次日，請檢查細(xì)胞是 否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系。
 

HCC1937細(xì)胞ATCC CRL-2336人乳腺癌細(xì)胞培養(yǎng)操作

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。**天換液并 檢查細(xì)胞密度。
  2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。        1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
       2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。      
     3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
       4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
  3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
        1. 細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
        2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識。
       3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

HCC1937細(xì)胞ATCC CRL-2336人乳腺癌細(xì)胞培養(yǎng)注意事項

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn) 象發(fā)生請及 時和我們聯(lián)系。
  2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所 需細(xì)胞因子 等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致。若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問 題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
  3.   用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會有少量 從瓶 壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時,再取出觀察。此時多數(shù)細(xì)胞均 會貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán) 染色測定細(xì)胞活力，如果證實細(xì)胞活力正常， 請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活 力，請拍下 照片及時和我們聯(lián)系，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
  4.   靜置細(xì)胞貼壁后，請將細(xì)胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基倒出，留 6~8mL 維持細(xì)胞正常培養(yǎng)，待細(xì) 胞匯 合度  80%左右時正常傳代。
  5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細(xì)胞 傳代時可以 一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
  6.   建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和 Procell 技術(shù) 部 溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián) 系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們 的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
  7.該細(xì)胞僅供科研使用。